Emily Kinney lahir dan dibesarkan di Nebraska oleh orang tua bernama Vaughn Charles dan Jeanne Kinney. Ia memiliki seorang kakak perempuan bernama Sara. Keluarganya sering pindah tempat tinggal selama masa kecilnya, termasuk ke Nevada, Oregon, dan bagian lain di Nebraska. Emily sempat berkuliah di New York University selama satu semester sebelum akhirnya lulus dengan gelar Bachelor of Arts di bidang teater dari Nebraska Wesleyan University pada tahun 2006. Setelah itu, Emily pindah ke New York untuk mengejar karir di Broadway dan dunia akting.
Karir profesional Emily Kinney dimulai saat ia bekerja di kedai kopi, di mana ia mulai bertemu dengan orang-orang dari industri akting dan musik. Selama empat tahun kuliah, Emily telah tampil dalam 20 pertunjukan teater dan memulai karir akting profesionalnya pada usia 21 tahun, ketika ia mendapatkan peran dalam pertunjukan teater Spring Awakening sebagai Anna, seorang gadis sekolah Jerman muda. Tahun berikutnya, Emily berperan sebagai Jean Fordham dalam pertunjukan teater August: Osage County. Kemudian, ia mendapatkan peran sebagai Emily dalam serial The Big C dari Showtime. Emily juga pernah tampil sebagai bintang tamu dalam Law & Order: Criminal Intent dari NBC, di mana ia berperan sebagai Jeannie Richmonds. Debut film Emily dimulai dengan perannya sebagai Gina dalam film Aunt Tigress. Emily terus berakting dalam berbagai peran tamu dan cameo di berbagai film dan acara televisi. Pada tahun 2011, Emily mendapatkan peran sebagai karakter berulang Beth Greene dalam The Walking Dead, serial televisi horor dari AMC. Meskipun saat itu ia berusia 25 tahun, karakter Beth yang diperankannya adalah adik perempuan Maggie yang berusia 16 tahun pada musim kedua. Setelah dua tahun bermain dalam serial tersebut, Emily mendapatkan promosi menjadi pemeran utama. Karakter Beth adalah salah satu dari kelompok kecil yang harus mencari cara untuk bertahan hidup dalam kiamat zombie, sambil juga harus menghadapi para survivor lain yang lebih berbahaya daripada mayat hidup. Emily juga berkontribusi dalam The Walking Dead: Original Soundtrack - Vol. 1, di mana ia berkolaborasi dengan Lauren Cohan dalam lagu berjudul "The Parting Glass". Emily mengakhiri perannya di The Walking Dead sebagai Beth pada tahun 2014, tetapi membuat penampilan terakhirnya pada tahun 2015 dalam episode kesembilan musim kelima. Pada November 2018, Emily kembali memerankan peran Beth Greene melalui suara, yang terdengar dalam episode terakhir Andrew Lincoln sebagai Rick Grimes saat Beth bertanya apa luka yang dialami Rick.
Selain itu, Emily Kinney juga kembali ke waralaba Law & Order dalam Law & Order: Special Victims Unit, dalam peran Haley Cole. Ia merilis EP keduanya yang berjudul Expired Love pada tahun 2013, yang kemudian dirilis ulang pada tahun 2014 dengan tambahan dua lagu. Dalam sebuah wawancara dengan AMC, Emily berbicara tentang cerita dalam albumnya: "Expired Love" adalah tentang kisah saya. Tetapi saya pikir gaya karier akting saya juga sangat mempengaruhi. Lagu-lagu saya mirip dengan Tom Waits dalam hal cerita kecil. Kadang-kadang saya menulis lagu berdasarkan satu kata atau perasaan yang terus muncul dalam hidup saya. Dan saya merasa bahwa karena saya belum pernah memerankan karakter selama ini, hal itu tidak bisa tidak masuk ke dalam hal-hal yang saya lakukan. Seperti, mungkin inilah mengapa ide tertentu terus muncul dalam hidup saya, karena ini adalah sesuatu yang terus kita hadapi dalam pertunjukan!". Single terbaru Emily yang berjudul "Rockstar" dirilis pada tanggal 9 Desember 2014. Setelah meninggalkan The Walking Dead, Emily tampil sebagai bintang tamu dalam beberapa acara televisi, termasuk peran utama dalam episode keenam belas dari Forever berjudul "Memories of Murder" dari ABC dan peran pendukung dalam episode kedelapan belas dari The Flash berjudul "All-Star Team-Up" dari The CW. Ia juga mendapatkan peran berulang dalam acara televisi The Knick dari Cinemax dan Masters of Sex yang mendapat pujian kritis dari Showtime selama empat episode. Emily juga tampil dalam video musik untuk lagu "Rockstar" dari band Nickelback pada tahun 2015.