I Spit on Your Grave III: Vengeance Is Mine melanjutkan kisah kelam Jennifer Hills yang kembali diperankan oleh Sarah Butler sebagai Jennifer Hills alias Angela Jitrenka, bersama Jennifer Landon sebagai Marla dan Doug McKeon sebagai Detektif McDylan. Film ini membawa kita masuk lebih dalam ke trauma, kemarahan, dan rasa keadilan yang mulai kabur batasnya.

Setelah selamat dari kekerasan brutal di masa lalu dan berhasil membalas dendam tanpa harus menjalani hukuman, Jennifer mencoba memulai hidup baru di Los Angeles. Ia meninggalkan impian lamanya sebagai penulis dan kini bekerja sebagai operator hotline untuk korban kekerasan seksual. Menggunakan identitas baru sebagai Angela, Jennifer juga rutin mengikuti sesi konseling kelompok dan terapi pribadi. Meski terlihat berusaha bangkit, trauma yang ia alami membuatnya sulit mempercayai pria, bahkan terhadap rekan kerjanya sendiri yang berniat baik.

Di dalam kelompok konseling, Jennifer bertemu Marla, sosok yang memiliki luka serupa dan pandangan sinis terhadap dunia. Keduanya menjalin kedekatan dan perlahan memulai aksi balas dendam terhadap para pelaku kekerasan seksual yang lolos dari hukum. Namun, saat Jennifer mulai merasakan sedikit ketenangan, Marla justru ditemukan tewas secara misterius tanpa ada pelaku yang dihukum. Kematian ini menghancurkan Jennifer dan memicu kemarahannya terhadap sistem hukum yang ia anggap gagal melindungi korban.

Didorong rasa frustasi, Jennifer mengambil jalan ekstrem. Ia memburu para pelaku yang tidak tersentuh hukum, menjebak mereka, lalu menyiksa dan membunuh mereka satu per satu. Targetnya termasuk pria yang diduga bertanggung jawab atas kematian Marla hingga pelaku kekerasan dalam keluarga dari anggota kelompoknya. Dalam perjalanannya, Jennifer juga berteman dengan Oscar, seorang pria yang kehilangan putrinya akibat trauma kekerasan seksual. Bersama, mereka mencoba menemukan pelaku yang menghancurkan hidup anak tersebut.

Namun, aksi Jennifer mulai menarik perhatian polisi. Saat salah satu rencananya gagal dan pelaku tewas ditembak polisi, Jennifer ditahan dan diinterogasi. Identitas aslinya terungkap, tetapi situasi berubah ketika Oscar mengaku sebagai pelaku pembunuhan sebelum akhirnya meninggal akibat luka yang ia buat sendiri. Jennifer pun dibebaskan, meski tetap diawasi ketat.